【pbs缓冲液配方】PBS(Phosphate Buffered Saline)是一种常用的生理缓冲液,广泛应用于生物实验中,如细胞培养、免疫组化、洗涤细胞等。其主要作用是维持细胞的渗透压和pH值,使细胞在实验过程中保持稳定状态。以下是PBS缓冲液的基本配方及其制备方法。
一、PBS缓冲液简介
PBS缓冲液由磷酸盐、氯化钠和氯化钾等成分组成,具有与人体体液相近的渗透压,因此常用于模拟生理环境。根据用途不同,PBS可以分为无钙镁型(Ca²⁺/Mg²⁺ free)和含钙镁型两种,分别适用于不同的实验需求。
二、常见PBS缓冲液配方(1×)
成分 | 含量(g/L) | 说明 |
NaCl | 8.0 | 提供渗透压 |
KCl | 0.2 | 维持离子平衡 |
Na₂HPO₄ | 1.44 | 磷酸盐缓冲系统 |
KH₂PO₄ | 0.24 | 磷酸盐缓冲系统 |
蒸馏水 | 1L | 溶解上述成分 |
> 注:此为标准1× PBS配方,pH约为7.4,适合大多数细胞实验使用。
三、制备步骤
1. 称量:按照上述比例称取各成分。
2. 溶解:将NaCl、KCl、Na₂HPO₄和KH₂PO₄依次加入适量蒸馏水中,搅拌至完全溶解。
3. 定容:将溶液转移至1L容量瓶中,加蒸馏水至刻度线。
4. pH调节:用稀盐酸或氢氧化钠调节pH至7.4。
5. 灭菌:可通过高压灭菌(121℃,15分钟)或过滤除菌处理。
四、应用注意事项
- 储存条件:未灭菌的PBS应冷藏保存,避免微生物污染;已灭菌的可常温保存。
- 使用范围:适用于细胞清洗、组织块处理、抗体稀释等。
- 特殊需求:若需去除钙镁离子,可选择不含Ca²⁺/Mg²⁺的PBS配方。
五、总结
PBS缓冲液是一种基础而重要的实验试剂,其配方简单但功能强大。正确配制和使用PBS能有效保障实验结果的准确性与重复性。根据实验目的选择合适的配方,并注意储存与使用规范,是实验室操作中的关键环节。